Создание мышиной модели вагинальной стрептококковой инфекции группы B

Возьмём культуру группы B Streptococcus или GBS, оппортунистического бактериального патогена.

Разведите культуру в свежих средах и инкубируете, чтобы получить активно делящиеся бактерии.

Перенесите культуру в коническую трубку.

Центрифуга, чтобы пеллетировать бактерии, затем выбросить супернатант.

Промой бактерии буфером.

Снова центрифугировать, удалить супернатант и вернуть бактерии в буфер.

Далее используйте самок, обработанную гормонами, с подготовленным вагинальным эпителием, более подверженной инфекциям.

Сдержите мышь. С помощью тонкого наконечника пипетки введите подвеску GBS во влагалищный просвет.

Отпустите мышь, поднимите хвост и дайте передним лапам идти по твёрдой поверхности.

Это способствует удержанию инокулума во влагалищном просвете, обеспечивая адреза GBS.

Осмотрите отверстие во влагалище на наличие обратного оттока инокуля.

Прилипшие бактерии колонизируют поверхность эпителия влагалища и вызывают инфекцию.

Модель мыши с вагинальной инфекцией готова к дальнейшим исследованиям.

В тот же день инъекции выращивают пятимиллилитровую жидкую культуру штамма GBS, интересующего в бульоне Тодда Хьюитта, или THB, при температуре 37 градусов Цельсия.

На следующее утро субкультурировать GBS в