Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:41 мин. • February 26th, 2026
Возьмём суспензию патогенных бактерий.
Добавьте суспензию в приклеенную культуру макрофагов или клеток BMDM, полученных из костного мозга, и инкубируете.
Бактерии используют свои поверхностные белки для связывания с рецепторами клеток хозяина, что способствует их прикреплению.
Прополосните буфером, чтобы удалить не прилипшие бактерии.
Добавьте свежие материалы и инкубируете.
Прилипшие бактерии затем внутрь поглощаются клетка-хозяином.
Добавьте антибиотик для уничтожения неинтернализированных бактерий.
Сбросьте медиа и смойте с помощью буфера.
Добавьте охлаждённую воду, чтобы лизировать клетку-хозяина, высвобождая содержимое клеток, ядро и внутренние бактерии.
Соберите лизат клетки и центрифугите для осаждения клеточных обломков.
Соберите супернатант, содержащий бактерии. Пропустите его через фильтрационное устройство для захвата целых бактерий.
Сложите фильтрующую бумагу и положите её в трубку.
Мгновенная заморозка в жидком азоте для сохранения целостности клетки.
Храните в холодных условиях для дальнейшего использования.
Используя 0,5 миллилитра промытой бактериальной суспензии, инфицируйте каждую пластину макрофага. Если используете несколько пластин, размещайте инфекции с интервалом в 15 мину
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео