Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:06 мин. • March 31st, 2026
Начните с обездвиженного, вскрытого мышиного мочевого пузыря, предварительно инфицированного β-галактозидазой уропатогенным кишечным палочкой, помещённого в многоколодчатую пластину с силиконовым покрытием.
Просвет мочевого пузыря обращён вверх, обнажая эпителиальные клетки, содержащие внутриклеточные бактериальные сообщества (IBC).
Промыйте мочевой пузырь буфером, чтобы удалить мусор и не прикреплённые бактерии.
Далее добавьте фиксирующее средство и инкубируете, чтобы сохранить клеточные и бактериальные структуры.
Снимите фиксатор и стирайте буфером.
Затем промыйте с помощью буфера с моющим средством для проникновения клеточных и бактериальных мембран.
Удалите буфер, затем добавьте раствор X-гал — субстрата из β-галактозидазы, дополненного редокс-реагентами, и инкубируете.
X-gal и редокс-реагенты попадают в бактерии. β-галактозидаза расщепляет X-гал, образуя бесцветный промежуточный продукт, который окисляется редокс-реагентами для образования синего осадка.
Под дисекционным микроскопом синие точки в мочевом пузыре подтверждают наличие IBC, что указывает на инфекцию мочевыводящих путей.
Для перечисления IBC, после извлечения мочевого пузыря, поместите его в силиконовое покрытие в шести-лун
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео