Создание мышиной модели ожоговых инфекций патогенными бактериями

Начните с анестезиированной мыши с выбритой спиной.

Разместите мышь с крышкой для чашки Петри под брюшком, чтобы удерживать спину горизонтально.

Окуните латунный блок в стакан с кипящей водой, пока он не нагреется.

Тем временем вводите обезболивающий через подкожную инъекцию.

Затем прижмите нагретый латунный блок к выбритой спине мыши.

Тепло повреждает самый внешний слой кожи — эпидермис — и распространяется на подлежащие ткани, создавая ожоговую рану.

Удалите блок и введите физиологический раствор подкожно, чтобы предотвратить обезвоживание.

Затем нанесите инокулюм патогенных бактерий, подвешенных в буфере.

Используйте стерильную ватную палочку, чтобы равномерно распределить бактерии по ране.

Бактерии прикрепляются к клеточным рецепторам с помощью поверхностных белков, начинают колонизацию, образуют защитную биопленку и формируют локализованную инфекцию.

Эта мышиная модель ожоговой инфекции готова к изучению взаимодействия хозяина и патогена.

После анестезии мыши, согласно текстовому протоколу, используйте машинку для стрижки волос с 50 лезвиями, чтобы побрить мышь с спины, чтобы максимально открыть кожу. Затем поместите крышку 35-миллиметровой чашки Петри под брюшком мыши, чтобы удерживать спину в относительно горизонтальном положении.

Используйте плитку размером 10 на 10 дюймов при 220 VAC, чтобы вкипятить воду в стакане на 150 миллилитров. Погрузите латунный блок в стакан до достижения термического равновесия с водой. Перед получением ожоговой травмы введите подкожную инъекцию превентивных обезболивающих для облегчения боли.

Через десять минут, надевая термоперчатки, аккуратно прижимайте нагретый латунный блок к выбритой части на спине мыши в течение семи секунд, чтобы вызвать ожог. Введите 0,5 миллилитра стерильного физиологического раствора через подкожные инъекции. Через пять минут после индукции термической травмы используйте пипетку, чтобы имокулировать 50 микролитров бактериальной суспензии с 5 умножением на 10 до шестого КФУ в PBS на ожоги мыши.

Затем, двигая стерильную ватную палочку зигзагообразным движением по коже, наносите аликвот на ожоги для равномерного распределения бактериальных клеток в обожжённой зоне.