Терапия синим светом для лекарственно-устойчивых бактериальных инфекций при ожогах в модели мыши

Начните с анестезиированной мыши с открытой спиной, которую кладут на крышку чашки Петри.

У мыши ожоговая рана, инфицированная биолюминесцентными, лекарственно-устойчивыми бактериями.

Закройте глаза мыши алюминиевой фольгой, чтобы избежать чрезмерного воздействия синего света.

Поместите мышь под синим светодиодом на фиксированном расстоянии.

Облучить рану с постоянной интенсивностью. Увеличивайте время воздействия для увеличения доз.

Свет проникает в ткани раны и достигает колонизацирующих бактерий.

Внутри этих бактерий светочувствительные молекулы поглощают синий свет и фотоактивируются, образуя реактивные кислородные формы (ROS).

ROS повреждает бактериальные компоненты, включая биолюминесцентные белки, что приводит к гибели бактериальных клеток с минимальным ущербом окружающей ткани.

После каждого контакта проводите биолюминесцентную визуализацию для мониторинга жизнеспособности бактерий вокруг раны.

По мере увеличения дозы сигнал соответственно снижается.

Это снижение указывает на антибактериальный эффект окислительного стресса, вызванного синим светом.

После анестезии мышей, согласно текстовому протоколу, случайным образом разделите животных на группу с антимикробным синим светом или aBL и нелечённую контрольную группу. Для группы, обработанной aBL, используйте алюминиевую фольгу, чтобы закрыть глаза мышей, чтобы избежать чрезмерного воздействия света. Поместите ожоги мыши прямо под светодиод с крышкой из 35-миллиметровой чашки Петри под брюшком мыши, чтобы удерживать спину в горизонтальном положении.

Затем замените индикатор энергии на мышь на квадратной чашке Петри. Затем настройте высоту мыши обратно так, чтобы расстояние между диафрагмой светодиода и поверхностью горения мыши было равно расстоянию между диафрагмой светодиода и световым датчиком энергетического прибора. Облучайте зараженные ожоги с радиацией 100 милливатт на сантиметр в квадрате.

Подавайте aBL в аликвотах 72 джоуля на сантиметр в квадрате до достижения общей дозы 360 джоулей на сантиметр в квадрате. После каждой дозы света проводите биолюминесцентную визуализацию ожогов мыши, как показано ранее в этом видео. Для необработанной контрольной группы проводите биолюминесцентную визуализацию ожогов мыши с использованием тех же временных интервалов, что и для группы, обработанной aBL.