Установление биопленок между бактериями и грибами для изучения патогенеза полости рта

Начните с культур Streptococcus mutans, перральной патогенной бактерии, и Candida albicans, оппортунистического грибкового патогена.

Переместить изолированные колонии в питательную среду и инкубировать за ночь для обеспечения активного роста.

Центрифуга для гранулирования клеток. Удалите супернатант и снова суспензуйте клетки в стерильном физиологическом растворе до определённой концентрации.

Возьмите многопластовую пластину, покрытую человеческим раствором слюны, чтобы имитировать оральную среду.

Добавьте C. albicans и инкубировать для прикрепления к слюненному покрытию. Промыйте стерильным физиологическим раствором, чтобы удалить неприлипшие клетки.

Добавьте термоинактивированную сыворотку и инкубировать для стимуляции развития гиф. Смойте избыточную сыворотку.

Введите S. mutans, затем среду, богатую сахарозой, и инкубируете. S. mutans выделяет глюкозилтрансферазу, которая связывается с маннами C. albicans .

Этот фермент катализирует сахарозу в глюканы на поверхности гриба, закрепляя бактерии с гифами и способствуя пролиферации и формированию матрикса.

Этот метод позволяет моделировать микробную синергию между царствами биопленки в полости рта.

Выращивать S. mutans и C. albicans на кровян