Микроскопическая оценка прикрепления бактерий к поверхности корней растений

Возьмите образцы корней из растений, выращенных в песке, содержащем патогенные бактерии.

Разместите образец с помощью воды и накладного слоя.

Наблюдайте под микроскопом фазового контраста, чтобы усилить контраст и визуализировать корневую шерсть и бактерии без окрашивания.

Положите образец в флакон с водой.

Переверните флакон, чтобы промыть образец и удалить свободные и слабо прикреплённые бактерии.

Установите промытый образец.

Если образец толстый, используйте пресс-наносящий накладку с приподнятым клеивым краем, чтобы предотвратить повреждение образца.

Поместите немного воды и образца внутрь накладки и прижмите затвор сверху, чтобы запечатать.

Переверните слайд и посмотрите под микроскопом.

Посчитайте количество бактерий, прикреплённых к корневым волоскам.

После инкубации растений с бактериями согласно текстовому протоколу подготовьте образец для микроскопии, поместив его в каплю воды или инкубационную среду на стекло микроскопа и непосредственно онаблюдая за ним.

Если видимых свободных бактерий нет, возможно, произошла гибель бактерий или бактериальное связывание с контейнером, в котором проводилась инкубация. Промыйте образец в воде или инкубационной среде, поместив его в флакон с жидкостью и аккуратно перевернув флакон. Затем поместите образец на стекло микроскопа в свежую жидкость для наблюдения.

Для установки образца используйте обычный скольжение крышки. Если образец толстый и образует выпуклость, добавьте жидкость и пробу в колодец пресса, наложите крышку с кольцом из резины или пластика по краю. Поставьте затвор сверху и аккуратно нажмите, чтобы запечатать крышку на затворе.

Инвертируйте слайд, чтобы изучить образец. В качестве альтернативы используйте слайд для подсчёта водорослей и скольжение крышки аналогичным образом и смотрите с увеличением не более чем в 20 раз.