Флуоресцентная визуализация колонизации бактерий в ткани почек мышей
Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:43 мин. • March 31st, 2026
Начните с почки мыши, инфицированной модифицированными грамположительными бактериями, которые колонизируют ткани и образуют поражения.
Все бактериальные клетки экспрессируют красную флуоресценцию, тогда как специфические условия хозяина позволяют экспрессировать зелёный флуоресцентный белок в определённых клетках.
Обрабатывайте почки фиксатором и инкубируете в темноте, чтобы сохранить структуру тканей и частично проницать клеточные мембраны.
Внедрить орган в подходящую среду, заморозить его и разрезать на тонкие слои ткани.
Положите кусок на заряженный стеклянный стекло для сцепления.
Покрасьте ткань ядерным красителем.
Краситель проникает в клетки хозяина и бактерий и связывается с ДНК.
Наденьте накладку на ткань и наблюдайте за стеклом под флуоресцентным микроскопом с помощью специальных каналов визуализации.
Ядерное окрашивание очертает ДНК хозяина и бактерий.
Все бактерии в ткани экспрессируют красную флуоресценцию, тогда как зелёная флуоресценция указывает на место взаимодействия хозяина и патогена.
В соответствующей экспериментальной точке изберите почки, сердце, печень, лёгкие и селезёнку в 15-миллилитровые полипропиленовые трубки с 10% буферным формалином для инкубации в темноте при
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео