Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:19 мин. • March 31st, 2026
Инфекция Streptococcus pneumoniae может вызывать образование микропоражений в сердечной ткани.
Бактерии внутри микропоражений вырабатывают токсины, которые препятствуют проникновению иммунных клеток хозяина внутри микропоражения.
Чтобы визуализировать эти микропоражения, возьмите усыпленную мышь, инфицированную S. пневмонии.
Продезинфицируйте область груди этанолом.
Сделайте разрез и перерезайте диафрагму.
Затем разрежьте и поднимите грудную клетку, чтобы открыть сердце.
Перережьте соединяющие сосуды и удалите сердце.
Промойте сердце буфером, чтобы удалить остатки крови.
Затем поместите сердце в кассету для сбора образцов тканей и погрузите её в фиксирующий раствор для фиксации сердечной ткани.
Получите корональный срез сердца и проведите окрашивание гематоксилином и эозином для окрашивания бактерий.
Под микроскопом визуализируйте микропоражение, содержащее окрашенные бактерии.
Собрать сердце. Обездвижите эвтаназированную мышь в положении на хирургической платформе, распылите грудь 70% этанола и высушите по груди. Хирургическими ножницами и щипцами откройте грудную полость, удалите грудную клетку и перерезайте диафрагму, чтобы открыть сердце и лёгкие.
Затем перережьте кровеносные сосуды, соединённые с сердцем, и с помощью щипцов аккуратно удалите сердце без синяков. Прополосните сердце с помощью PBS и поместите его в кассету для сбора образцов тканей для коронального сечения. Затем переведите кассеты в 10% буферизованный формалин, а на следующий день отправьте на парафиновое вложение.
На ранних стадиях сердечные поражения можно определить по изменению окраски, а в некоторых случаях — по наличию иммунных клеток. При запущенных поражениях иммунные клетки отсутствуют, а на их месте обнаруживаются крупные сосудистые поражения.