Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:33 мин. • February 26th, 2026
Начните с пластин, содержащих поверхностно прикреплённые бактерии и планктонные или свободно плавающие бактерии.
Добавьте клетки амёбы в оба образца.
Положите на каждый образец агарозную прокладку с кальцеином-AM — клеточно-проницаемым красителем.
Удалите лишнюю жидкость, дайте высохнуть и инкубуйте тарелки.
В пластине с поверхностно прикреплёнными бактериями поверхностный контакт усиливает гены вирулентности, экспрессируя токсины.
Эти токсины нарушают оболочку амёбы и меняют её форму.
Повреждённая мембрана амёбы позволяет большему числу кальцеина-AM попадать в цитоплазму, где внутриклеточные эстеразы расщепляют их в флуоресцентный кальцеин, что приводит к его накоплению.
В отличие от этого, планктонные бактерии, не имеющие контакта с поверхностью, остаются невирулентными, оставляя мембраны амёб нетронутыми. Это снижает попадание кальцеина-AM в амёбу, ограничивая накопление флуоресцентного кальцеина.
Здоровые амёбы также поглощают невирулентные бактерии.
Под флуоресцентным микроскопом яркие, округлые клетки амёбы указывают на вирулентное бактериальное взаимодействие, тогда как тусклые, аморфные амёбы указывают на невирулентное бактериальное взаимодействие.
Для анализа вирулентности поверхнос
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео