JoVE Encyclopedia of Experiments
Микробиология
0 просмотров • 1:45 мин • February 26th, 2026
Возьмём криосекции тканей из сцекумы — области толстой кишки. Один участок взят от мыши, инфицированной только Clostridioides difficile. Другая секция взята от мыши, соинфицированной C. difficile и Enterococcus feecalis.
В коинфицированных тканях E. faecalis метаболизирует аргинин хозяина и выделяет орнитин. C. difficile поглощает этот орнитин, способствуя образованию токсинов, связанным с ростом, и повреждению тканей.
Для анализа этих образцов с помощью MALDI-визуализации применяется равномерный слой матричного раствора.
Загрузите слайды в масс-спектрометр MALDI, где лазер сканирует ткань, ионизируя аминокислоты через матрицу.
Загрузите слайды в масс-спектрометр MALDI, где лазер сканирует ткань, ионизируя аминокислоты через матрицу.
Полученные ионы разделяются по соотношению массы к заряду и обнаруживают прибором для создания пространственных карт распределения аминокислот.
Соинфицированная ткань демонстрирует более низкий уровень аргинина и более высокий уровень орнитина по сравнению с моноинфицированным образцом, что поддерживает патогенез, вызванный микробной кооперацией C. difficile .
Выполните применение матрицы MALDI и масс-спектрометрию визуализации MALDI, как было показано ранее.
Проанализируйте ионные изображения из нескольких биологических репликат и сравните результаты для значимости с помощью сравнения с помощью интенсивного бокс-графика с помощью статистического программного обеспечения SCiLS.