Анализ устойчивости на этанол для оценки целостности матрицы биопленки

Возьмём биопленки, полученные от патогенных бактерий, выращенные на питательном агаре.

Необработанная биопленка содержит плотно упакованные бактерии в защитном внеклеточном матриксе.

Обработанная ингибиторами биопленка содержит слабо связанные клетки в разрежённой матрице.

Разрезать каждую биопленку пополам, затем подвергнуть одну половину буферизации в качестве контроля, а другую — этанолу для создания антимикробного стресса.

В необработанной, подверженной этанолу биоплёнке плотная матрица снижает диффузию этанола и ограничивает проникновение клеток, что приводит к меньшему уничтожению бактерий.

В обработанной ингибиторами биопленке, подвергшейся этанолу, разрежённая матрица позволяет этанолу проникать более легко, что приводит к большему уничтожению бактерий.

Центрифугуйте трубки и удалите супернатант. Добавьте буфер и соник, чтобы рассеять ячеек.

Разбавленные суспензии покройте в пластину и инкубируете, чтобы обеспечить рост жизнеспособных бактерий.

Подсчёт колониообразующих единиц (CFU); Меньшее количество CFU из обработанной ингибиторами и подвергшейся этанолу биопленки подтверждает, что целостность матрицы необходима для устойчивости к этанолу.

Возьмите чистое лезвие бритвы и разрежьт