JoVE Encyclopedia of Experiments
Микробиология
0 просмотров • 2:27 мин • March 31st, 2026
Начните с мыши, предварительно обработанной антибиотиками для истощения микробиоты кишечника.
Аккуратно удержите мышь в вертикальном положении, чтобы удлинить пищевод.
Далее возьмите иглу для орального гава, соединённую с шприцом, содержащим инокулюм спор, полученных из Clostridium difficile, анаэробного бактериального патогена.
Введите иглу через бок рта и медленно продвигайте её в пищевод.
Когда игла достигнет середины пищевода, медленно вводите инокулум и аккуратно убирайте иглу.
Введённые споры проходят через желудок в тонкий кишечник, где желчные соли вызывают прорастание вегетативных бактерий C. difficile .
Эти бактерии мигрируют в анаэробную кишку, где истощение конкурирующей микробиоты способствует прилиянию к эпителиальной поверхности, размножению и формированию колоний.
Колонизированные бактерии выделяют токсины, которые нарушают эпителиальные соединения и повреждают кишечный барьер. Это нарушение барьера способствует переносу бактерий в более глубокие ткани, формируя Clostridium difficile iнфекцию.
В ламинарном капюшоне возьмите мышь и обездвижите голову, аккуратно удерживая животное за свободную кожу шеи и спины.
Используя указательный палец и следя, чтобы животное не издавало звуки и не проявляло признаков беспокойства, дополнительно обездвижите голову животного и удлиняйте пищевод. Держите мышь в вертикальном положении и аккуратно проведите иглу в бок рта. Наведите иглу по нёбу и медленно продвигайте её в пищевод.
Когда игла примерно наполовину погружается в пищевод, введите 25 микролитров инокулума спор и аккуратно вынимите иглу. Верните животное в клетку и наблюдайте за признаками кашля или дыхательной недостаточности, которые могут указывать на случайное введение трахеи.