Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:36 мин. • March 31st, 2026
Возьмём суспензию патогенной бактерии, выделенной из инфицированного растения.
Бактериальный геном содержит транскрипционное слияние, при котором промотор регуляционного гена вирулентности также управляет экспрессией гена флуоресцентного белка без промоторов.
Во время заражения растениями активация промотора запускает производство регуляторных и флуоресцентных белков.
Регуляторный белок активирует гены вирулентности, а флуоресценция обеспечивает измеримый показатель активации вирулентности.
Центрифугуйте клетки, сбросьте супернатант, затем снова суспенгируйте, чтобы получить концентрированную суспензию.
Капли на ковлшип и наложите агарозную подушечку, чтобы распределить и обездвижить клетки.
Сделайте яркое изображение для идентификации всех бактериальных клеток, затем флуоресцентное изображение для обнаружения одноклеточной флуоресценции.
Объедините оба для визуализации различий интенсивности флуоресценции, которые выявляют субпопуляции с высокой, низкой или отсутствующей экспрессией генов вирулентности.
Это фенотипическое разнообразие отражает адаптивную стратегию, способствующую выживанию бактерий во время колонизации растений.
Для одноклеточного анализа приготовьте 1,5% агарозный раствор
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео