Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 4:12 мин. • August 31st, 2026
Начните с гепатоцитов, культивируемых в чашке с коллагеновым покрытием.
Введите реагент для трансфекции в комплексе с двумя плазмидами: одна из которых содержит модифицированный геном вируса гепатита B (HBV), а другая кодирует структурные белки вируса.
Инкубируйте для обеспечения проникновения плазмиды. Внутри клетки экспрессируются вирусные гены для синтеза структурных белков и модифицированного генома HBV, которые затем собираются в частицы рекомбинантного HBV.
Замените среду и инкубируйте для поддержания продукции и высвобождения вирусных частиц.
Соберите среду и центрифугируйте её для осаждения клеточного дебриса.
Соберите супернатант и профильтруйте его для удаления оставшегося клеточного дебриса.
Затем добавьте полиэтиленгликоль и хлорид натрия для осаждения вирусных частиц.
Центрифугируйте для осаждения содержимого. Растворите осадок в буфере и удалите клеточный дебрис путем центрифугирования. Затем нанесите полученный раствор на сахарозную подушку.
Проведите ультрацентрифугирование для осаждения вирусных частиц через подушку.
Удалите супернатант и ресуспендируйте осадок в среде.
Профильтруйте суспензию и храните очищенный рекомбинантный HBV при низкой температуре для последующего ана
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео