Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:24 мин. • August 31st, 2026
Возьмите пробирки, содержащие вирусные капсиды, которые представляют собой вирусоподобные частицы без генетического материала.
Нагревайте пробирки при постоянной температуре в течение разного времени.
Более короткое время нагрева вызывает умеренный стресс белков капсида, в то время как длительный нагрев разрушает капсид и приводит к агрегации.
Быстро охладите пробирки, чтобы предотвратить дальнейшие структурные изменения.
Перенесите жидкость на парафиновую пленку.
Поместите сеточку для просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) на каплю. Капсиды прикрепляются к поверхности сеточки.
Промокните сетку фильтровальной бумагой, чтобы удалить излишки жидкости.
Промойте буфером, чтобы удалить слабосвязанные капсиды, затем снова промокните сетку.
Погрузите в уранил-ацетат — краситель на основе тяжелого металла, который связывается с поверхностью капсида, благодаря чему те выглядят темнее при ПЭМ.
Промокните сетку и поместите ее на пластину. Храните пластину в эксикаторе для удаления влаги.
Выполните визуализацию сетки с помощью ПЭМ для анализа повреждений капсида, вызванных воздействием тепла.
Проведите термическую обработку, как описано ранее, за исключением того, что вместо 10 мМ HEPES (pH 7.4) ис
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео