Очистка вируса из аллантоической жидкости эмбрионированных куриных яиц

Начните с резервуара, содержащего аллантоическую жидкость, полученную из инфицированных вирусом куриных яиц.

Эта жидкость содержит вирусные частицы, а также примеси, происходящие от организма хозяина.

Пропустите жидкость через глубинный фильтр, чтобы задержать крупные загрязнения, позволяя при этом проходить более мелким примесям и вирусам.

Затем загрузите отфильтрованную жидкость в систему фильтрации, где она будет течь тангенциально по поверхности мембраны.

Более мелкие загрязнения проходят через мембрану, в то время как вирус задерживается и концентрируется.

Нанесите концентрированный вирус на градиент плотности и центрифугируйте его. Вирус образует отчетливую полосу в том месте, где его плотность совпадает с плотностью градиента.

Соберите полосу, обогащенную вирусом, в диализную кассету и поместите ее в буфер. Компоненты градиента диффундируют наружу, в то время как вода из буфера диффундирует внутрь через полупроницаемую мембрану.

Затем поместите кассету в гипертонический раствор, чтобы вывести воду и сконцентрировать очищенный вирус.

Для очистки вируса болезни Ньюкасла или NDV сначала подготовьте предварительно настроенную экспериментальную систему, пропустив через нее 50 milliliters