Оценка подавления бактериального роста с помощью бактериофагов с использованием измерений оптической плотности

Используйте многолуночный планшет, содержащий серийные разведения суспензии фагов в питательном бульоне в качестве опыта и бульон без фагов в качестве контроля.

Добавьте E. coli в каждую лунку. С помощью спектрофотометра измерьте базовую оптическую плотность (OD), чтобы зафиксировать начальную концентрацию бактерий.

Затем инкубируйте планшет для обеспечения роста бактерий и инфекции фагами.

В контроле бактерии потребляют питательные вещества и размножаются, что приводит к увеличению OD.

В ходе обработки фаги связываются с рецепторами на поверхности бактерий и вводят свои геномы в цитоплазму.

Используя аппарат клетки-хозяина, вирусный геном реплицируется и синтезирует вирусные белки, которые собираются в новые вирусные частицы. Эти частицы лизируют клетку, высвобождая потомство.

Измеряйте OD через определенные интервалы времени для сравнения роста бактерий.

В контрольных лунках наблюдается постепенное увеличение OD, в то время как в лунках, обработанных фагами, значения OD ниже, при этом более значительное снижение отмечается при более высоких концентрациях фагов.

Это помогает определить концентрацию фага, необходимую для максимального подавления роста бактерий.

Для начала подготовьте микроп