Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 5:13 мин. • August 31st, 2026
Возьмите ядра клеток, содержащие вирусные геномы, меченные алкин-модифицированными нуклеотидами.
Суспендируйте ядра в смеси биотин-азида и ионов меди, затем инкубируйте.
Ионы меди способствуют образованию ковалентной связи между азидной и алкиновой группами.
Центрифугируйте и удалите супернатант.
Ресуспендируйте в буфере, перенесите и центрифугируйте для получения осадка.
Быстро заморозьте, а затем разморозьте осадок, чтобы облегчить лизис.
Ресуспендируйте и подвергните воздействию ультразвука для лизиса ядер.
Центрифугируйте образец и соберите супернатант, содержащий комплексы белков с вирусной ДНК.
Отфильтруйте супернатант для удаления примесей.
Разбавьте фильтрат.
Добавьте магнитные бусины, покрытые стрептавидином, и проинкубируйте для обеспечения связывания с биотинилированными белково-ДНК-комплексами.
Приложите магнитное поле для сбора магнитных частиц и проведите промывку для удаления загрязнений.
Повторите промывку.
Добавьте элюирующий буфер и нагрейте пробу, чтобы разделить и денатурировать белки.
Отделите магнитные бусины, соберите элюат.
Быстро заморозьте выделенные белки. Храните при ультранизких температурах для последующего анализа.
После полного удаления PBS повторно суспендируйте ос
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео