Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:51 мин. • August 31st, 2026
Возьмите лентивирусные векторы, содержащие антиген HIV-1 p24 — белковый маркер, используемый для детекции.
Добавьте детергент для лизиса и высвобождения p24, затем проведите серийное разведение образца.
Возьмите микропланшет, покрытый моноклональными антителами к p24 и блокирующим агентом для предотвращения неспецифического связывания.
Добавьте разведения образцов и стандарты p24 в качестве контролей.
Инкубируйте для обеспечения взаимодействия p24 с антителами через специфический эпитоп, затем удалите несвязавшиеся компоненты.
Инкубируйте с поликлональными антителами к p24, которые связываются с различными эпитопами p24. Удалите все несвязавшиеся антитела.
Добавьте антитела, конъюгированные с пероксидазой, которые связываются с поликлональными антителами. Удалите несвязавшиеся антитела.
Добавьте субстрат пероксидазы, который преобразуется в окрашенный продукт.
Добавьте кислоту для инактивации пероксидазы и стабилизации продукта.
Измерьте абсорбцию, соответствующую интенсивности окраски, которая пропорциональна концентрации p24.
Постройте стандартный график и определите концентрации образцов для расчета вирусного титра.
Покройте планшет с высокой связывающей способностью на 96 лунок 10 мкл мон
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео