Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 5:56 мин. • August 31st, 2026
Начните с клеточного лизата, содержащего клеточную ДНК, агрегированную с клеточными белками и вирусными частицами.
Добавьте ионы магния, а затем нуклеазу, чтобы активировать ферментативную деградацию клеточной ДНК и разрушить агрегаты ДНК–белок.
Центрифугируйте смесь для отделения клеточного дебриса и соберите супернатант, содержащий вирусные частицы.
Осторожно нанесите супернатант на ступенчатый градиент иодиксанола с возрастающей концентрацией сверху вниз, затем долейте в пробирку буфер.
Ультрацентрифуга для разделения компонентов по плотности. Вирусные частицы накапливаются на границе раздела слоев высокой и средней плотности.
Введите иглу в этот интерфейс и соберите вирусные частицы в пробирку.
Добавьте буфер, содержащий стабилизирующие компоненты, чтобы предотвратить агрегацию вирусных частиц.
Затем перенесите раствор в пробирку с мембранным фильтром.
Центрифугируйте образец для концентрирования вирусных частиц над фильтром.
Добавьте буфер с добавлением стабилизирующего агента и снова центрифугируйте для получения очищенных вирусных частиц.
Для сбора трансфицированных клеток отделите их от поверхности и суспендируйте, используя культуральную среду и многократное пипетирование. Затем пер
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео