Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:35 мин. • August 31st, 2026
Используйте в качестве исходного материала отфильтрованный клеточный лизат, содержащий векторы на основе аденоассоциированного вируса (AAV) и примеси клеточного происхождения.
Пропустите лизат через аффинную колонку на основе гепарина.
Белки вирусного капсида электростатически связываются с отрицательно заряженными гепариновыми группами.
Промойте колонку буфером для удаления несвязавшихся загрязняющих веществ.
Добавьте буфер, содержащий детергент, для солюбилизации мембранного дебриса.
Снова промойте буфером без детергента.
Внесите буфер с добавлением катионов для создания ионной среды, затем промойте умеренно солевым буфером для удаления слабосвязанных примесей.
Добавьте буфер с высокой концентрацией соли, чтобы разрушить взаимодействия между капсидом и гепарином и элюировать вирусные частицы.
Соберите элюционные фракции, обогащенные интактными вирусными частицами, и перенесите их в центрифужные концентраторы, оснащенные фильтрующими мембранами.
Центрифугируйте пробирки для удаления избытка буфера, затем соберите концентрированные вирусные фракции в отдельную пробирку.
Промойте мембрану буфером, чтобы восстановить остаточные вирусные частицы и максимально увеличить выход.
Разморозьте сырой л
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео