Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 4:09 мин. • September 30th, 2026
Начните с многолуночного планшета с клетками млекопитающих, подвергнутыми воздействию рекомбинантного вируса вакцины.
Рекомбинантный вирус кодирует зеленый, красный и синий флуоресцентные белки, экспрессия каждого из которых контролируется стадия-специфическим промотором для отслеживания ранней, промежуточной и поздней стадий экспрессии генов соответственно.
Вирус проникает в клетку посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза и высвобождает свое вирусное ядро в цитоплазму.
Транскрипционный аппарат в вирусном ядре обеспечивает экспрессию ранних генов, которая характеризуется зеленой флуоресценцией.
Ранние белки опосредуют разбор оболочки генома, высвобождая вирусную ДНК в цитоплазму, где ДНК-полимераза реплицирует вирусный геном.
Затем экспрессия промежуточных генов, о чем свидетельствует красная флуоресценция, приводит к синтезу транскрипционных факторов, необходимых для активации поздних генов.
Затем экспрессия поздних генов, о чем свидетельствует синяя флуоресценция, приводит к синтезу структурных белков, необходимых для формирования зрелых вирионов.
Добавьте фиксатор и кратковременно инкубируйте для сохранения флуоресценции.
Удалите фиксатор, затем добавьте буфер.
Используйте спектро
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео