Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:08 мин. • September 30th, 2026
Начните с плазмиды минигенома, которая имитирует геном вируса Эбола и кодирует структурные белки вируса, гликопротеины и репортерную люциферазу.
Добавьте вспомогательные плазмиды, кодирующие Т7-полимеразу, вирусный нуклеопротеин и компоненты вирусной полимеразы, необходимые для репликации и транскрипции.
Добавьте липидный реагент для трансфекции к плазмидам, перемешайте на вортексе и инкубируйте смесь для формирования плазмидно-липидных комплексов.
Добавьте эту смесь к клеткам почки человека, аккуратно перемешайте и инкубируйте.
Липидный комплекс сливается с клеткой. Плазмиды проникают в клетку.
Вспомогательные плазмиды кодируют соответствующие белки.
Впоследствии РНК-полимераза T7 транскрибирует минигеном в вирусную геномную РНК, которая немедленно покрывается нуклеопротеинами.
Вирусный полимеразный комплекс связывается с вирусной геномной РНК и транскрибирует ее в вирусные мРНК. Эти мРНК обеспечивают синтез вирусных структурных белков и гликопротеинов.
Вирусные белки собираются в непатогенные транскрипционно- и репликативно-компетентные вирусоподобные частицы (trVLP), содержащие репортерный ген люциферазы.
Добавьте свежую среду для поддержания жизнеспособности клеток и обеспечения продукц
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео