Производство и сбор терапевтических эпителиальных клеток, продуцирующих вирус

Начните с использования культур эпителиальных клеток почек, поддерживаемых в среде с добавлением сыворотки.

Замените эту среду на безсывороточную среду, содержащую генно-инженерные вирусы с иммуномодулирующими генами для терапевтического применения.

Инкубируйте клетки, чтобы вирус мог прикрепиться к рецепторам на поверхности клеток.

Удалите супернатант, содержащий остатки неприкрепившегося вируса.

Добавьте свежую среду с сывороткой для поддержания жизнеспособности клеток и инкубируйте.

Во время инкубации вирус проникает в клетку посредством рецепторного эндоцитоза, высвобождает свой геном, и этот геном вырабатывает вирусные РНК.

Вирусный геном реплицируется, в то время как вирусная РНК обеспечивает синтез новых вирусных белков.

Вирусные белки собираются в новые вирусные частицы, которые затем высвобождаются в окружающую среду.

Эти дочерние вирусы проникают в соседние клетки, вызывая инфицирование и формируя кластеры инфицированных клеток.

Аккуратно снимите монослой клеток скребком для сбора клеток, продуцирующих терапевтическое вирусное потомство.

Соберите суспензию в пробирку и храните при низкой температуре для дальнейшего анализа.

Для анализа кинетики репликации вируса кори за один день до