Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:56 мин. • September 30th, 2026
Возьмите суспензию, содержащую разнообразную смесь вирусов, а также примеси, такие как дефектные вирусные частицы, лишенные нуклеиновых кислот.
Эти вирусы предварительно окрашивают флуоресцентным красителем, связывающимся с нуклеиновыми кислотами, чтобы отличить вирусы, содержащие геном, от загрязнений.
Пропустите суспензию через флуоресцентный сортер клеток, где каждая частица анализируется по светорассеянию и интенсивности флуоресценции.
Сигнал светорассеяния отражает размер частиц, в то время как интенсивность флуоресценции указывает на содержание нуклеиновых кислот.
Исключите контаминанты, не проявляющие флуоресценции, и агрегаты с аномально высокой флуоресценцией.
Отберите одиночные вирусные частицы, содержащие геном, и отсортируйте их непосредственно на камерный предметный стеклан с агарозным покрытием для иммобилизации.
Покройте каждую лунку дополнительным слоем агарозы, чтобы зафиксировать вирусы.
Теперь они готовы к амплификации и анализу генома одиночных вирусов.
Для сортировки вирусов с помощью проточного цитометра, оснащенного специальными фотоумножителями прямого светорассеяния (FSC-PMT), начните с разведения вирусных частиц в фильтрованном через фильтр 0,1 мкм растворе Tris-E
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео