Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 4:36 мин. • September 30th, 2026
Используйте лентивирусы, несущие ген устойчивости к антибиотику.
Центрифугируйте для отделения клеточного дебриса. Соберите супернатант, содержащий вирусы, и пропустите его через мембрану, не содержащую поверхностно-активных веществ.
Это позволяет лентивирусам проходить насквозь, задерживая при этом загрязняющие вещества.
Используйте ультрацентрифугу для концентрирования вирусов. Удалите супернатант и добавьте буфер для ресуспендирования вирусов.
Затем перенесите суспензию в микроцентрифужную пробирку и перемешайте на вортексе.
Центрифугируйте для удаления пузырьков. Затем добавьте вирусы в среду для инфицирования, содержащую эмбриональные стволовые клетки мыши, и перемешайте.
Центрифугируйте для улучшения контакта вируса с клетками, затем инкубируйте.
Вирусы доставляют свои геномы в клетки.
Удалите среду, добавьте свежую среду и инкубируйте.
Вирусный геном преобразуется в ДНК и интегрируется в геном хозяина, что обеспечивает синтез мРНК, которая направляет синтез белка устойчивости к антибиотику.
Замените среду на свежую среду с добавлением селективного антибиотика и инкубируйте.
Клетки, экспрессирующие белок устойчивости к антибиотику, выживают, в результате чего образуются стабильные инфиц
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео