Получение почечных почечных почечных клеток человека из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток: процедура направленной дифференцировки зрелых почечных подоцитов из стволовых клеток

Зрелые клетки могут быть перепрограммированы на восстановление их недифференцированного и пролиферативного состояния, подобного стволовым клеткам. Эти перепрограммированные клетки называются индуцированными плюрипотентными стволовыми клетками или IPSC. Чтобы дифференцировать плюрипотентные клетки в подоциты – специализированные клетки, участвующие в фильтрации отходов из почек, начните с приема суспензии человеческих IPSC в индукционной среде мезодермы.

Перенесите эту суспензию на цокольную матрицу, покрытую питательной пластиной, и инкубируйте. Матрица основания облегчает адгезию IPSC в основании. Впоследствии специфические факторы, присутствующие в среде, индуцируют дифференцировку IPSC в клетки мезодермы, клетки-предшественники подоцитов. Отсасывайте отработанную среду.

Дополните планшет желаемым объемом промежуточной среды для индукции мезодермы и инкубируйте в течение длительного времени. Этот этап приводит к дифференцировке мезодермальных клеток в незрелые подоциты. Замените промежуточную среду для индукции мезодермы раствором трипсина, чтобы диссоциировать адгезивные клетки от пластины.

Далее центрифугу для гранулирования ячеек. Выбросьте надосадочную жидкость, содержащую ра