Выделение гладкомышечных клеток Detrusor: процедура ферментативного пищеварения для получения клеток DSM из образцов мочевого пузыря человека

Гладкомышечные клетки детрузора, или DSM, присутствующие в стенке мочевого пузыря, составляют основную функциональную единицу мочевого пузыря. Эти клетки расслабляются, способствуя накоплению мочи в мочевом пузыре, и сокращаются, чтобы выпустить мочу.

Чтобы выделить клетки DSM, начните со взятия взятого образца мочевого пузыря человека. Промойте образец, чтобы удалить следы крови и мусора. Впоследствии закрепите ткань ее слизистой поверхностью вверх. Иссеките жир, кровеносные сосуды и слой слизистой, чтобы обнажить нижележащий детрузорный мышечный слой. Затем разрежьте свободную от слизистой ткани на мелкие фрагменты.

Обработайте фрагменты тканей коктейлем для пищеварения, содержащим папаин, и инкубируйте. Папаин, протеолитический фермент, способствует перевариванию белков во внеклеточном матриксе, которые удерживают клетки вместе, и инициирует ослабление клеток в матриксе. Теперь удалите патаин-содержащую надосадочную жидкость.

Добавьте к фрагментам ткани суспензию фермента коллагеназы и инкубируйте при физиологической температуре. Коллагеназа разрушает внеклеточный матрикс и способствует диссоциации клеток DSM. Инкубация при физиологической температуре помогает сохранить целостно