Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 2:42 мин. • April 30th, 2023
Раковые сфероиды представляют собой трехмерные клеточные агрегаты опухолевых клеток. Эти сфероиды могут встраиваться в коллагеновый матрикс, в результате чего образуются сфероидальные блоки. Чтобы мгновенно заморозить сфероидальный блок, начните с размещения сфероидального блока коллагенового геля в центре гистологической формы.
Промойте блок подходящим буфером и дополните форму фиксирующим раствором. Инкубируйте, чтобы этот раствор проник в сфероиды и сшил клеточные белки. Этот шаг помогает сохранить структуру сфероида для последующей процедуры. Далее отсасывайте фиксирующий раствор.
Поместите сфероидный гелевый блок в свежую гистологическую форму, содержащую тонкий слой закладной среды. Наложите на него больше закладной среды, чтобы полностью погрузить блок сфероидов. Наконец, погрузите форму в ванну с жидким азотом на короткое время.
Быстрое замораживание предотвращает образование более крупных кристаллов льда внутри сфероидов. Это помогает сохранить целостность сфероида, не вызывая механических повреждений. Как только слой закладочной среды затвердеет вокруг сфероидального блока, извлеките замороженный блок из формы. Замороженный сфероидный блок хранить при низких температурах
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео