Гидродинамическая инъекция почечной лоханки: метод прямой доставки ДНК в клетки почек мышиной модели

Чтобы доставить плазмидную ДНК непосредственно в клетки почек мыши, начните с помещения мыши, находящейся под наркозом, в боковое положение. Подготовьте мышь, удалив ее спинной мех сбоку. Найдите подходящее место разреза на левом боку, ниже грудной клетки.

Сделайте небольшой разрез в коже и нижележащих мышечных слоях. Затем слегка надавите на брюшную полость, чтобы обнажить почку через место разреза. Частично удалите покрывающую промежность жировую ткань для визуализации почечной лоханки.

Теперь возьмем шприц, содержащий плазмидную ДНК в гидродинамическом буфере доставки. Введите иглу непосредственно в почечную лоханку – треугольный, расширенный участок мочеточника в почке. Введите раствор плазмиды быстро так, чтобы ДНК напрямую достигла почечной паренхимы – функциональной части почки, которая фильтрует кровь.

Быстрая доставка большого объема жидкости через почечную лоханку создает высокое давление, создавая переходные поры в плазматической мембране клеток почечной паренхимы. Это облегчает поступление плазмид в клетки. В конце концов, эти поры закрываются, захватывая плазмиды внутри клеток.

Наконец, втяните иглу и верните почку в брюшную полость. Сшить кожу и мышечные слои в месте