Депигментация и преокрашивание почек данио-рерио: техника подготовки почки взрослой рыбки данио к окрашиванию

Почка взрослой рыбки данио представляет собой полупрозрачную структуру, расположенную рядом со стенкой спинного тела рыбы. В почке наблюдается наличие поверхностных черных пятен, соответствующих рассеянным меланоцитам – специализированным клеткам, защищающим стволовые клетки почки от вредного ультрафиолетового излучения.

Чтобы депигментировать и подготовить почку к окрашиванию, начните с приема усыпленной взрослой рыбки данио. Погрузите целых рыбок данио в подходящий фиксирующий раствор и инкубируйте в течение нужной продолжительности. Инкубация позволяет фиксирующему раствору проникнуть в тело рыбы и зафиксировать компоненты тканей на месте.

Далее поместите рыбку данио вентрально и удалите ее голову. Сделайте длинный вентральный разрез, начинающийся под областью головы и простирающийся до хвостового плавника. Удалите органы, чтобы обнажить нижележащую почку. С помощью щипцов отсоедините почку от спинной стенки и поместите ее в стеклянный флакон.

Обработайте рассеченную почку возрастающей концентрацией раствора сахарозы. Раствор сахарозы создает изотоническую среду, предотвращающую усадку почек. Впоследствии инкубируют почку в отбеливающем растворе, чтобы удалить пигментацию мелано