Аспирация жидкости из клубочков мыши: метод аспирации клубочковой жидкости из мыши с помощью двухфотонной микропунктуры

В почках клубочек — пучок мелких кровеносных сосудов, заключенный в капсулу Боумена — инициирует фильтрацию крови и выводит отработанную жидкость в окружающее пространство Боумена. Исследование содержимого клубочковой жидкости помогает понять физиологию почек.

Чтобы аспирировать клубочковую жидкость, подготовьте мышь, находящуюся под наркозом, и ее почка будет выведена хирургическим путем. Теперь введите флуоресцентный краситель в кровеносные сосуды за глазной орбитой мыши. Молекулы флуоресцентного декстрана перемещаются по кровотоку и достигают почек.

Благодаря высокой молекулярной массе декстрана флуоресцентный краситель задерживается в клубочке, придавая ему зеленый цвет. Под двухфотонным микроскопом, который позволяет визуализировать глубоко расположенные структуры, найдите подходящий клубочек, чтобы получить адекватный доступ к клубочковой жидкости.

Затем совместите наконечник микропипетки с красным флуоресцентным покрытием из наночастиц с боковой осью почки. С помощью микроманипулятора продвиньте наконечник пипетки, чтобы проникнуть в почку. Когда наконечник достигнет целевого клубочка, установите желаемую скорость аспирации для аспирации клубочковой жидкости из пространства