Модель бактериального кератита роговицы свиньи ex vivo: методика выявления бактериальной инфекции в эпителиальных клетках роговицы

В глазу позвоночных роговица - самая внешняя защитная оболочка - инфицируется Pseudomonas aeruginosa, что приводит к воспалительному состоянию роговицы - кератиту.

Чтобы установить модель роговичного кератита ex vivo, поместите корнеосклеральную кнопку свиного глаза в чашку Петри. Этот тканевый сегмент состоит из роговицы, окруженной остатками склеры – фиброзного покрова глаза. Дополните чашку Петри антибиотикосодержащими средами для устранения загрязняющих микробов с эпителиальной поверхности роговицы.

Найдите центральную часть роговицы. Сделайте поверхностные горизонтальные и вертикальные разрезы по нужной схеме, прокалывая самый наружный эпителиальный слой роговицы. Перенесите разрезанную ткань роговицей вниз в специализированную полую форму.

Заполните полость роговицы разжиженным агаром и дайте ей застыть, удерживая ткань внутри формы. Переверните форму, чтобы обнажить поврежденную поверхность эпителия роговицы. Пипеткой введите суспензию Pseudomonas в надрезанные участки роговицы. Покройте форму большим количеством питательной среды для оптимального роста бактерий. Дополните блюдо для культуры средой и инкубируйте.

Бактерии проходят через разрез эпителия, чтобы проникнуть в ст