Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 4:15 мин. • July 8th, 2025
Сульфатированные гликозаминогликаны, такие как гепарансульфаты, ГС, представляют собой отрицательно заряженные, линейные, сульфатированные полисахариды переменной длины цепи, прикрепленные к белкам клеточной поверхности.
Чтобы оценить ГС разной длины, выделенные из легочной ткани мыши, начните со сборки гелевой кассеты. Частично заполните его высококонцентрированным акриламид-бисакриламидным раствором, включающим катализирующие агенты - персульфат аммония и тетра-метил-этилен-диамин. Покройте водой, чтобы предотвратить контакт с воздухом, который может препятствовать полимеризации. Инкубировать.
Катализирующие агенты индуцируют акриламид-бисакриламидную полимеризацию, образуя мелкопористый разрешающий гель. Слейте воду. Добавьте низкую концентрацию акриламид-бисакриламидного раствора с катализирующими агентами. Вставьте гелевую расческу для создания лунок. Раствор полимеризуется, образуя гель с большими порами.
Загрузите камеры резервуара для электрофореза рабочим буфером для обеспечения оптимальной электропроводности во время электрофореза.
Растворите смесь HS в загрузочном буфере, содержащем трекинговый краситель и сахарозу. Далее переложите эту смесь и стандартные лестницы HS в
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео