Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:57 мин. • July 8th, 2025
Во время регенерации кости остеобласты – костеобразующие клетки – рекрутируются к месту перелома, где они размножаются и выделяют остеоид – коллагеновый матрикс. После периода созревания остеобласты минерализуют остеоид путем регулируемого отложения ионов кальция и фосфата, инициируя синтез новой кости.
Для количественной оценки степени минерализации остеобластов in vitro получают первичную суспензию остеобластов в подходящих средах. Засейте суспензию в многолуночный планшет, содержащий пористые диски-заменители костного трансплантата, и инкубируйте.
Диски служат каркасом, обеспечивая адгезию и пролиферацию клеток.
Замените отработанные среды свежими средами, содержащими остеогенные добавки. Инкубируйте в течение длительного времени. Остеогенные добавки стимулируют остеобласты к производству и последующей минерализации коллагенового матрикса.
После фиксации окрашивать минерализованный матрикс ализарином красным S, ARS, раствором. АРС, отрицательно заряженный краситель, связывается с положительно заряженными ионами кальция в матрице, образуя комплекс красного цвета. Удалите излишки пятна. Сфотографируйте пластину для обнаружения отложений красного кальция, указывающих на минерализац
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео