Измерение сокращения SMC in vitro: неинвазивный метод оценки сокращения гладкомышечных клеток с использованием электрического измерения импеданса клетки-субстрата

Стенка аорты в основном содержит гладкомышечные клетки, или SMC, содержащие сократительные белковые механизмы, которые сокращаются и расслабляются, регулируя кровоток в аорте.

Чтобы измерить сократительную реакцию СМК аорты in vitro, приобретите многолуночный планшет, содержащий матрицу датчиков измерения импеданса электрической ячейки-подложки (ECIS). Каждый массив содержит золотые пленочные электроды на дне скважины, очерченные изоляционной пленкой. Смажьте лунки желатином.

Засейте первичную человеческую суспензию SMC в скважины. Перенесите содержащую ECIS пластину лунки на держатель пластины, подключенный к усилителю и системе сбора данных, обеспечивая при этом контакт электродов с держателем. Подайте небольшой постоянный переменный ток между электродами, чтобы измерить потенциал на них.

Во время инкубации SMC прилипают и распределяются по желатиновому покрытию. Ячейки ведут себя как изоляторы, ограничивая протекание тока между электродами. Чем больше ячеек прикрепляется к поверхности, тем больше поток тока уменьшается. В результате импеданс, или противодействие текущему потоку, и потенциал увеличиваются. В конце концов, клетки разрастаются на электродах и образуют монослой.

Обр