Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:32 мин. • July 8th, 2025
В биологических системах близость белка к его конкретному партнеру является решающим фактором, определяющим успешное белок-белковое взаимодействие. При наличии небольших ингибирующих молекул эти белки не могут двигаться рядом друг с другом, нарушая свои взаимодействия.
Для скрининга ингибирующих молекул на предмет нарушения взаимодействий между двумя белками – шапероном и ко-шапероном – берут многолуночный планшет, содержащий различные малые молекулы. Дополните лунки донорскими бусинами, к поверхности которых прикреплены со-шапероны. Эти шарики содержат фотосенсибилизаторы для хемилюминесцентного анализа.
Добавьте суспензию акцепторных шариков, конъюгированных с пептидными последовательностями, полученными из шаперона, которые специфически связываются с ко-шапероном. Шарики содержат краситель на основе тиоксена и флуорофоры, необходимые для визуализации.
В лунках с неингибирующими молекулами высокое сродство между шаперон-связывающими пептидами и ко-шаперонами привлекает акцепторные и донорские шарики. В то время как бусины остаются на расстоянии при присутствии ингибиторов.
С помощью хемилюминесцентного ридера изучите взаимодействие. При освещении на определенной длине волны фотос
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео