Анализ мониторинга подкисления кишечника: методика изучения подкисления просвета кишечника у дрозофил с использованием бромфенолового синего красителя

Средняя кишка насекомого содержит область медных клеток - CCR, которая отвечает за закисление кишечника. В этой области находятся специализированные секреторные клетки – медные клетки, которые вырабатывают кислоту, которая проходит через узкий канал, образованный соседними интерстициальными клетками. Кислота выделяется в просвет кишечника, способствуя пищеварению.

Чтобы контролировать закисление кишечника у дрозофил, принимайте взрослых мух, голодающих в течение достаточного времени. Поместите мух в тарелку Петри, содержащую одну каплю корма для мух с добавлением бромфенолового синего или BPB - pH-чувствительного индикаторного красителя. Позвольте голодным мухам добывать пищу в течение определенного периода времени.

После приема пищи кислота, вырабатываемая медными клетками, достигает просвета кишечника и смешивается с пищей, содержащей BPB. При кислом pH молекулы BPB протонируются, что меняет их цвет с синего на желтый, что указывает на закисление.

По завершении эксперимента поместите пластину Петри на лед. Низкая температура прекращает нервно-мышечную активность у мух и обезболивает их. Поместите отдельную муху под стереомикроскоп и хирургическим путем изолируйте неповрежденный п