Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 2:52 мин. • July 8th, 2025
Створки аортального клапана содержат гетерогенную популяцию интерстициальных клеток клапана, или ВИК, распределенных по слоям внеклеточного матрикса. При стимуляции ВИК трансформируются в остеобласты — клетки, формирующие костный матрикс.
Зрелые остеобласты секретируют коллаген и белки костного матрикса. Эти белки помогают остеобластам прикрепляться к матриксу. Наконец, внутриклеточные ионы кальция попадают в матриксную среду и вместе с фосфатами откладываются в виде минерализованных узелков, что приводит к кальцификации аортального клапана.
Чтобы оценить концентрацию кальция в кальцинированных аортальных клапанах, начните с посева ВИК в шестилуночном планшете. Выбросьте питательную среду, добавьте в лунку остеогенную среду, и инкубируйте.
Во время инкубации инсулин в остеогенной среде стимулирует дифференцировку ВИК в остеогенные фенотипы. Эти остеобласты секретируют белки костного матрикса и аскорбиновую кислоту в остеогенной среде, что побуждает их образовывать богатый коллагеном внеклеточный матрикс.
Наконец, внутриклеточный кальций остеобластов и фосфаты среды образуют минерализованные кристаллы в среде.
Удалите среду, и добавьте раствор соляной кислоты. Инкубируйте для раство
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео