Импедансный клеточный анализ для измерения множественности инфекции вируса гриппа

Во время вирусной инфекции вирус проникает в клетку через эндоцитоз и захватывает клеточный механизм хозяина, производя вирионы потомства. Они высвобождаются, заражая соседние клетки, вызывая каскад инфекций.

Чтобы измерить отношение вируса инфекционного гриппа к клетке в культуре — кратность инфекции — добавьте соответствующую плотность свежеполученной суспензии клеток млекопитающих в микротитровую пластину.

Пластина содержит импедансометрические микроэлектроды золота, встроенные в забой скважины. Инкубируйте, позволяя клеткам прилипнуть к дну лунки и достичь фазы экспоненциального роста до заражения.

Подайте небольшой электрический потенциал между микроэлектродами. Ячейки, прикрепленные к микроэлектродам, действуют как изоляторы, ограничивая протекание тока и увеличивая электрическое сопротивление — импеданс, который измеряется.

Извлеките носитель. Пипеткой заведите в лунки суспензию вируса гриппа. Дополните подходящей сериновой эндопротеазой.

Во время инкубации эндопротеаза серина расщепляет и активирует вирусный гликопротеин гемагглютинин, способствуя его связыванию со специфическими рецепторами клетки-хозяина и последующему проникновению вируса в клетки.

С помощью клеточного м