Анализ реактивных веществ тиобарбитуровой кислоты для оценки окислительного стресса в сыворотке крови человека

Клетки генерируют низкий уровень свободных радикалов во время метаболических процессов.

При патологических состояниях происходит перепроизводство свободных радикалов, вызывающих окислительный стресс. Эти свободные радикалы атакуют полиненасыщенные жирные кислоты в фосфолипидах клеточных мембран в процессе, называемом перекисным окислением липидов. При этом образуются токсичные продукты окисления, в том числе гидропероксиды липидов и малоновый диальдегид (МДА), которые вызывают повреждение мембран и гибель клеток.

Чтобы обнаружить окислительный стресс в сыворотке крови человека in vitro с помощью анализа реактивных веществ тиобарбитуровой кислоты (TBARS), начните с пробирки, содержащей сыворотку человека, обработанную соединением, вызывающим окисление. Обработанная сыворотка в основном содержит продукты перекисного окисления липидов — MDA и гидропероксиды липидов, а также фосфолипиды, липиды и белки.

Затем добавьте додецилсульфат натрия (SDS) и перемешайте для растворения липидов и высвобождения MDA. SDS денатурирует любые загрязняющие белки. Добавьте подходящий кислотный буфер, а затем кислую тиобарбитуровую кислоту (ТБК). Инкубировать при высокой температуре.

В кислых условиях и п