Анализ прорастания сосудистой оболочки глаза для изучения микрососудистой пролиферации глаза ex vivo

В глазу млекопитающих сосудистая оболочка, расположенная между склерой и сетчаткой, содержит периваскулярные макрофаги и хориокапилляры — слой кровеносных капилляров, выстланный перицитами, который снабжает сетчатку кислородом и питательными веществами. Аномальное прорастание кровеносных сосудов из хориокапилляров встречается при нескольких сосудистых заболеваниях глаз.

Чтобы изучить нарушение регуляции хориокапилляров, прорастающих ex vivo, возьмите собранные экспланты мышиного глаза, содержащие сосудистую оболочку, прикрепленную к склере и пигментному эпителию сетчатки, или РПЭ.

Добавьте капли экстракта базальной мембраны, или BME — гидрогеля, обогащенного белками внеклеточного матрикса, — в лунки многолуночного планшета. Поместите экспланты в каплю, не допуская сплющивания тканей. Дайте BME застыть.

Добавьте среду с добавлением эндотелиальных клеток, или ЕС-специфических факторов роста. Инкубировать. РПЭ секретирует фактор роста эндотелия сосудов, который, наряду с специфичными для ЭК факторами роста, стимулирует пролиферацию капиллярных ЭК

.

Затвердевший БМЭ образует внеклеточный матрикс, который способствует образованию пролиферирующих ЭК с образованием прорастающих капилляропо