Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:02 мин. • July 8th, 2025
В микросфере-ПЦР используется микроразмерная сфера, связанная с олигонуклеотидами на их поверхности, что обеспечивает преимущественную амплификацию одноцепочечной ДНК.
Чтобы начать микросферную ПЦР, берут реакционную смесь, содержащую матричные одноцепочечные нити ДНК, прямые праймеры с дополнительной нуклеотидной меткой, термостабильную ДНК-полимеразу, дНТП и микросферы, отображающие одноцепочечные олигонуклеотидные зонды.
Поместите трубку в амплификатор и запустите при определенных условиях.
В первом цикле, при температуре отжига, матричная ДНК связывается с зондом на поверхности микросферы таким образом, что матричная ДНК функционирует как смысловая цепь. При удлинении полимераза удлиняет ДНК, а дуплекс остается прикрепленным к микросфере.
В следующем цикле, во время денатурации, матричная ДНК отделяется от микросферы, оставляя цепь зонда связанной с поверхностью, которая служит матрицей для новой цепи.
Во время отжига меченый праймер связывается с антисмысловой нитью. Позже полимераза удлиняет его, чтобы синтезировать смысловую цепь с нуклеотидной меткой.
Повторите цикл несколько раз, чтобы получить несколько копий одноцепочечной ДНК, которые войдут в раствор, в то время как дв
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео