Методы ПЦР

Это видео демонстрирует роль цифровой капельной полимеразной цепной реакции в выявлении мутации индела в образце ДНК. Высокая точность и чувствительность ddPCR позволяют точно и последовательно обнаруживать редкие мутации, присутствующие в образце, даже при низких уровнях. Он может идентифицировать и количественно оценить индель-мутации в различных областях генома, предоставляя ценную информацию о механизмах мутаций и функциональных последствиях этих мутаций.

Это видео демонстрирует градиентную полимеразную цепную реакцию для оптимизации температуры отжига грунтов, которая устанавливает температуру градиентного отжига вдоль лунок. Влияние различных температур отжига определяется выходом амплифицированных продуктов, что помогает оптимизировать условия реакции.

В этом видео мы демонстрируем метод дуплексной цифровой ПЦР (ddPCR) — модификацию традиционной методики ПЦР, которая полезна для одновременного обнаружения двух разных генетических маркеров. Одна реакция ПЦР разбивается на эмульгированные капли размером в нанолитр, которые амплифицируются независимо друг от друга, а для вычисления начальной концентрации целевых последовательностей используется обнаружение сигналов усиления флуоресценции разного цвета из фракции капель.

Это видео демонстрирует количественный метод обнаружения вирусной инфекции с помощью ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени. На этапе обратной транскрипции РНК преобразуется в кДНК, которая затем амплифицируется с помощью циклов ПЦР. Наличие вирусной РНК в образце подтверждается анализом кривых амплификации и диссоциации ДНК, полученных в результате ПЦР.

Это видео описывает блокирующую полимеразную цепную реакцию дикого типа, или WTB-PCR, которая обнаруживает соматические мутации. В методе, основанном на ПЦР, используется заблокированная нуклеиновая кислота, или LNA, олигонуклеотид, который связывается с его комплементарным аллелем дикого типа и блокирует его удлинение. Блокирование избирательно позволяет амплификацию низкоуровневых мутантных аллелей по их вариантам дикого типа в образце.

В этом видео мы обсуждаем количественную полимеразную цепную реакцию, qPCR, для перечисления бактериофагов T7 с помощью количественного определения ДНК. Флуоресцентный краситель в смеси ПЦР связывается с вновь синтезированными нитями ДНК и излучает флуоресценцию, которая измеряется.

Это видео описывает технику амплификации одноцепочечной ДНК с использованием полимерных микросфер, покрытых олигонуклеотидами, в однотрубной реакции. В результате этого процесса получается чистая одноцепочечная ДНК, которая в дальнейшем может быть использована для секвенирования ДНК и анализа микрочипов.

Это видео описывает вложенную полимеразную цепную реакцию, метод, который состоит из двух последовательных процессов амплификации ПЦР с использованием двух наборов праймеров. Первый набор праймеров предназначен для отжига до последовательностей, предшествующих второму набору, что приводит к селективной амплификации конкретных последовательностей генов. Эта ПЦР более чувствительна и специфична, чем обычная ПЦР, и широко используется в качестве метода выявления различных заболеваний.

В этом видео мы описываем метод ПЦР с высоким разрешением для определения полиморфизма длины фрагментов ДНК различной длины последовательности на основе анализа температуры плавления.

Это видео демонстрирует метод мультиплексной капельной полимеразной цепной реакции для одновременной количественной оценки метилированных участков ДНК в различных популяциях белых кровяных клеток в качестве раннего биомаркера для клинической диагностики и прогноза.

Это видео демонстрирует полезность цифровой ПЦР в формате чип-в-пробирке для обнаружения однонуклеотидных вариаций в образцах ДНК. Одна реакция ПЦР разбивается на камеры, которые действуют как независимые реакции ПЦР, а обнаружение сигналов флуоресценции от амплифицированных мишеней в камерах используется для вычисления частоты вариантного аллеля в образце.

Это видео демонстрирует цифровую ПЦР на основе чипа — разновидность метода цифровой ПЦР, которая полезна для обнаружения редких вариантов транскрипта. Реакция ПЦР разбита на камеры наножидкого чипа, каждая из которых действует как независимая реакция. Обнаружение сигналов флуоресценции из камер с усиленными мишенями подтверждает наличие в образце редких вариантов транскриптов.