Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 8:51 мин. • July 8th, 2025
МикроРНК, микроРНК, представляют собой небольшие одноцепочечные, некодирующие РНК. МикроРНК объединяются в мультибелковый комплекс и в дальнейшем связываются с комплементарными последовательностями мРНК-мишеней для негативной регуляции экспрессии генов.
Чтобы обнаружить специфическую микроРНК из общей РНК из растительных тканей, добавьте гелеобразующий краситель, содержащий трекинговые красители и формамид — РНК-денатурирующее средство. Нагрейте образец, чтобы денатурировать РНК и предотвратить образование вторичной структуры перед электрофорезом.
Загрузите образец и стандартные маркеры РНК в лунки предварительно собранного денатурирующего полиакриламидного геля. Запустите электрофорез, облегчающий разделение фрагментов РНК по размеру.
Перенесите гель на предварительно смоченную фильтровальную бумагу на кассете для электроблоттинга. Направьте на гель пропитанную буфером капроновую промокательную пленку. Затем сложите предварительно смоченную фильтровальную бумагу. Проведите электроблоттинг.
Электрический ток заставляет отрицательно заряженную РНК, в том числе микроРНК, перемещаться из геля на положительно заряженную поверхность нейлоновой мембраны. Подвергать мембрану воздействию у
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео