Методы блоттинга

В этом видео мы описываем анализ точечной блоттинга для количественной оценки вирусного генома. Интенсивность сигнала напрямую связана с количеством вирусной ДНК в образце.

Это видео описывает технику дот-блоттинга для определения уровня метилирования ДНК в хондроцитах человека in vitro путем блоттинга образцов ДНК на нейлоновой мембране и последующей визуализации с использованием моноклональных антител. Это помогает определить фенотип хондроцитов на различных этапах культивирования.

Это видео демонстрирует метод количественного точечного блоттинга, или QDB, для абсолютной количественной оценки белков, представляющих интерес в образце ткани. Белки в образце иммобилизованы на нитроцеллюлозной мембране внутри лунок планшета QDB. Используя целевые белок-специфические антитела, меченные ферментом пероксидазой, хемилюминесцентный субстрат окисляется с образованием света, который измеряется для определения концентрации белка в образце.

Видео демонстрирует технику вестерн-блоттинга, основанную на нормализации общего белка, для количественной оценки экспрессии целевого белка в образце. Используя общее окрашивание образца белком, проводят ратиометрический анализ для определения относительного уровня экспрессии целевого белка.

В видео описывается метод вестерн-блоттинга с одной клеткой, который идентифицирует состав отдельных клеток, захваченных на чипе вестерн-блоттинга с одной клеткой в гетерогенной суспензии. Метод определяет интенсивность флуоресценции флуорофора, помеченного белковым маркером, специфичным для клетки-мишени.

Это видео описывает вестерн-блоттинг иммунопреципитированных лизатов на основе хемилюминесценции. Этот метод помогает определить процесс обработки и активации белка. Обнаруживаемый хемилюминесцентный сигнал пропорционален уровню переработки белка при его активации.

В этом видео мы описываем метод Саузерн-блоттинга для идентификации гомологичных рекомбинационных событий в геноме эмбриональных стволовых клеток мыши с помощью радиоактивно меченых зондов. Участки ДНК, содержащие гомологичные события рекомбинации, проявляются в виде отдельных полос, когда мембрана, содержащая зонд-связанную ДНК, подвергается воздействию рентгеновских лучей.

В этом видео мы демонстрируем северный блот, метод гибридизации для обнаружения и количественного определения микроРНК (микроРНК) из общего количества РНК, извлеченных из растительных тканей.