Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 6:43 мин. • July 8th, 2025
Белок-белковые взаимодействия, ИПП, имеют решающее значение в регулировании большинства биологических процессов.
Чтобы определить ИПП с помощью полевого биозондирования, начните с графенового полевого транзисторного чипа. Чип содержит функционализированную карбоксилом графеновую поверхность в качестве полупроводникового канала между исходным и дренажным электродами.
Инкубируйте чип со свежим раствором карбодиимида и N-гидроксисульфосукцинимида, сульфо-NHS, в цвиттер-ионном буфере. Этот буфер создает подходящий pH, позволяя карбодиимиду и сульфо-NHS активировать функционализированные карбоксильные группы чипа, образуя аминоактивные эфиры.
Добавьте раствор целевого белка. Первичные амины вступают в реакцию с аминоактивными эфирами, иммобилизуя белки на чипе за счет образования амидных связей. Добавьте аминосодержащий гасящий раствор для блокировки несвязанных аминоактивных эфиров, предотвращая неспецифическое связывание.
Вставьте чип в электронный считыватель и откалибруйте его с помощью буфера. Считыватель подает постоянное напряжение между электродами. Измеряется результирующее протекание электрического тока между электродами в состоянии «анализируемый-несвязанный».
Добавьте самую
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео