Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 5:16 мин. • July 8th, 2025
Чтобы обнаружить антиген-антителенные взаимодействия с помощью массовой фотометрии, сначала инкубируйте желаемую концентрацию очищенных антигенов и антител в течение необходимого периода времени, способствуя связыванию антиген-антитело. Основываясь на стехиометрии связывания антигена, паратопные области этих антител могут иметь различное количество присоединенных антигенов.
Пропустите раствор, содержащий свободные антитела вместе с комплексами антиген-антитело, через предварительно собранную проточную камеру. Закрепите камеру на предметном столике микроскопа массового фотометра. Затем направьте лазерный луч через проточную камеру для получения оптимального изображения.
В зависимости от количества присоединенных антигенов к каждому антителу молекулярная масса комплексов изменяется. Эти изменения массы приводят к тому, что комплексы по-разному рассеивают свет.
Комплексы с более высокой молекулярной массой, в которых два антигена связаны с обоими паратопами одного антитела, рассеивают больше света по сравнению с комплексами, содержащими один антиген. Кроме того, свободные антитела демонстрируют наименьшее рассеяние света.
Детектор собирает рассеянный свет и измеряет его частоту и инте
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео