Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 4:43 мин. • July 8th, 2025
Для начала проведения кондуктимометрического биосенсорного анализа на основе β-лактамаз необходимо установить микросхему преобразователя с рабочими, счетчиком и электродами сравнения. Рабочий электрод имеет проводящее полимерное покрытие, облегчающее иммобилизацию целевого антигена. На контрольных и противоэлектродах отсутствует это полимерное покрытие.
Добавьте на чип раствор, содержащий целевой антиген. Инкубировать. Антиген иммобилизуется на поверхности рабочего электрода в результате нековалентных взаимодействий. Промойте для удаления несвязанных антигенов.
Добавьте решение для блокировки. Белки в растворе прикрепляются к несвязанным участкам на рабочем электроде и блокируют их.
Добавьте в чип бифункциональный химерный белок, чтобы обнаружить иммобилизованный антиген. Химерный белок содержит фермент β-лактамазу — бактериальный белок, отвечающий за устойчивость к антибиотикам. Фермент сливается с нанотелом — N-концевой вариабельной областью однодоменных антител.
При инкубации нанотело белка связывается с иммобилизованным антигеном-мишенью. Промойте, чтобы удалить несвязанные химерные белки.
Подключите микросхему к цифровому мультиметру, управляемому компьютером. Добавьте детекти
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео